饲料中霉菌毒素的种类及检测方法

饲料及原料被霉菌污染后，当达到霉菌生长繁殖所需要的适宜条件时，霉菌就会快速繁殖并产生霉菌毒素。饲料霉变后，不但会降低或丧失营养价值：而且被动物摄食后，会抑制动物免疫机能、降低生产和繁殖性能等，给畜牧业带来严重危害。其次，霉菌毒素在畜禽产品中残留，严重影响畜禽产品品质；被人类食用后，给人类健康带来严重威胁。因此加大对霉菌毒素的研究具有十分重要的意义。

l 霉菌毒素的种类及危害

按照霉菌种属分类，主要分为：曲霉菌属，主要产生黄曲霉毒素、赭曲霉毒素等；青霉菌属主要产生赭曲霉毒素、展青霉素等；镰刀菌属主要产生玉米赤霉烯酮、呕吐毒素、T-2毒素、烟曲霉毒素等：麦角菌属主要产生麦角毒素。其次同一种毒素也可能由不同种属霉菌产生，因为每种霉菌可能会因条件不同而产生不同种类毒素。

按照霉菌毒素产生的条件，可分为仓储毒素和田间毒素；顾名思义，仓储毒素主要在农作物储存过程中产生的霉菌毒素，主要有黄曲霉毒素、赭曲霉毒素等；田间毒素主要是饲料原料在田间生长及收割过程中产生的霉菌毒素，主要有玉米赤霉烯酮、呕吐毒素、烟曲霉毒素、T-2毒素、麦角毒素等。

霉菌毒素种类多达数百种，对畜禽危害比较严重且报道较多主要有黄曲霉毒素B₁(AFB₁)、赭曲霉毒素A(0TA)、玉米赤霉烯酮(ZEN)、单端孢霉烯族毒索、伏马菌素(FB)、等。

黄曲霉毒素B₁(AFB₁)：

黄曲霉毒素是一类剧毒化学物质。主要由黄曲霉菌和寄生曲霉菌产生。其毒性最大，也是研究和报道最多的霉菌毒素之一，能与动物DNA、RNA等结合，从而抑制DNA合成；其次破坏动物免疫系统，损害动物肝脏。动物中毒后，轻则食欲减退，生产性能下降，重则导致死亡。

赭曲霉毒素A(OTA)：

赭曲霉毒素，主要由曲霉菌属和青霉属菌产生；是抑制蛋白质合成的关键酶，其可降低蛋白质的合成效率，进而影响DNA和RNA的合成。主要损伤动物肾脏及免疫系统，并能导致癌变和畸形。动物易渴、尿频、生长迟缓和饲料利用率降低，临床症状还有腹泻、厌食和脱水。

玉米赤霉烯酮(ZEN)：

玉米赤霉烯酮玉米赤霉烯酮由镰刀菌属产生，是一种植物源雌激素。主要对动物生殖系统有影响。家畜对此敏感性较高，相关研究表明，此中毒素会引起母猪不孕、流产、假发情、死胎、公猪精液质量下降等；家禽对此敏感性相对较低。

单端孢霉烯族毒素：

单端孢霉烯族毒素主要由镰刀菌属产生，是一大类倍半萜烯化合物，其中T-2毒素和呕吐毒素(DON)是此类毒素的典型代表。除对动物肝、肾具有损伤外，还对消化系统具有很大影响。动物中毒临床症状表现为食欲减退、胃肠炎症、出血、呕吐、免疫机能下降等。

伏马菌素(FB)：

伏马菌素是一类由不同的多氢醇和丙三羧酸组成的结构类似的双酯化合物，由镰刀茵属产生。其中此类毒素中，毒性最强是FB₁。对动物肝、肾、免疫系统都有很大损伤作用，会导致动物生产性能下降甚至死亡。

其他：

除以上报道比较集中的几种个毒素外，如烟曲霉毒素、麦角毒素等对动物生产力、繁殖性能、免疫系统等也具有很大危害，其中烟曲霉毒素在饲料中也比较常见。据最近饲料及原料霉菌毒素污染调查显示，饲料中一般不会单独存在，常常几种毒素同时存在，且会产生协同效应，进一步加大对动物健康及生产性能的影响。

2 霉菌毒素检测方法

霉菌毒素的检测方法包括目测法、实验室检测法及质谱检测法等。

目测法：

饲料出现霉变时，轻则会出现发热、异昧、色泽变暗，饲料结块，严重者腐烂变质。在饲料储藏期间一定要定期查看，早发现早处理。

实验窒检测法：

霉菌毒素的检测一般分为萃取、净化和测定三个步骤。首先要使用萃取试剂对样品毒素进行萃取，净化处理后进行检测。常用的萃取剂有氯仿-水或乙晴-水等：净化方法一般采用薄层法、反相分配柱法、免疫亲和柱法等：测定方法包括高效液相色谱法(HPLC)、酶联免疫法(ELISA)、薄层色谱法(TLC)等。

高效液相色谱法(HPLC)：

HPLC可以采用柱前柱后衍生，灵敏度较高，该法回收率可达80％以上。

酶联免疫吸附测定方法(ELISA)：

此方法主要用于检测AFB₁，一般可用于AFB₁的快速定性或定量分析。其优点是检验快速，适合量多的样品检测；但有时受其它物质影响会出现假阳性，需用其他方法进一步确认。

薄层色谱法：

本法适用于黄曲霉毒素、赫曲霉毒素、赤霉烯酮类等多种霉菌毒素的定性和定量检测。薄层色谱法检验结果比较准确，但该方法检验步骤多，耗时长，一般用于特殊情况下的精确验证检测

质谱法：

质谱法是最近几年新兴的检测方法，是霉菌毒素检测领域最准确可靠的检测方法，也是目前采用的主要检测方法。现在常用的质谱法包括液相色谱一质谱联用法、基质辅助激光解析电离一质谱联用法、离子迁移光谱技术等。现在，能直接读取定量数据的手持式检测仪也已经研制成功并开始商业化生产；这种检测方法所需成本较低，便于携带，可现场操作，非常适合对原料及饲料中霉菌毒素含量的常规检测。

其他：

除以上方法外，霉菌毒素检测方法还有镜检法、气相色谱法、微柱法等；传统的快速检测法还有皮肤反应法、皮下注射法筛查法、抑菌试验等。

3 小结

霉菌毒素对人类和畜禽的危害已经受到人们的高度重视，如何快速精确检测霉菌毒素的种类及含量，并及时采取防范措施，仍然是科技工作者急需解决的热点问题。现在已经报道的检测方法各有优缺点，侧重的霉菌毒素种类及精确度也有差别。相信随着科技的进步，检测精度更高、操作更简便、价格更加低廉的方法会替代传统的检测方法。