紫外分光光度法检测饲料级林可霉素预混剂的含量

紫外分光光度法检测饲料级林可霉素预混剂的含量

陈丽  冯建文  谭宝玲 陈玲

（广东温氏食品集团有限公司  527439）

摘要：目的：测定饲料级林可霉素预混剂的含量。 方法：采用紫外分光光度法，选定林可霉素的波长为380nm。 结果：线性范围26.6～199.3μg/ml（R²=0.9996）,平均回收率为95.70％，RSD为2.16%（n＝6）。结论：本法快速，简便，结果准确。

关键词：紫外分光光度法  林可霉素  含量

林可霉素（lincomycin）是一种高效广谱抗生素。于1962年由美国人Mason等首先从链霉菌林可变种培养液中获得，从此获得广泛应用。林可霉素的分子式为C₁₈H₃₄N₂O₆S，分子量为406.56。林可霉素对革兰氏阳性菌有较强的抑菌作用，特别是对链球菌、金黄色葡萄球菌及厌氧菌的抗菌作用尤其为明显，在许多感染症的治疗中疗效显著^[1]。林可霉素的预混剂添加到饲料中，可促进鸡的生长发育，节约饲料成本，提高经济效益，同时还具有预防球虫病的作用。但要把握添加量，添加量过多会造成饲料的浪费和产生耐药性，过少又达不到良好的效果和经济效益。

林可霉素的测定方法有很多，其中常用的主要有生物效价法、旋光法、高效液相色谱法以及分光光度法。生物效价法虽然测定准确，但是其测定周期长而且操作复杂无法达到快速的要求；旋光法则分辨能力较差，准确性较低。高效液相色谱法虽然准确，但成本昂贵，操作繁琐。本文研究了采用紫外分光光度法检测预混料中的林可霉素的含量，操作简单，快速。

1.   仪器与试剂

  UV-7502 PC 紫外分光光度计，超声波发生器AS1320

  盐酸林可霉素标准品(含量85.4％，由中国药品生物制品检定所提供)

盐酸1mol/L  双蒸水

PdCl₂（0.02mol/L的盐酸溶液，由上海润捷化学试剂有限公司提供）

PdCl₂,盐酸均为分析纯。

2.   实验内容

2.1 林可霉素吸收波长的确定

根据文献报道，林可霉素与PdCl₂在酸性条件下可以形成有色的络合物^[1]的络合物随林可霉素的浓度增大而颜色加深，因此可以用分光光度法进行定量测定饲料中林可霉素的含量。

将盐酸林可霉素标准品配成300μg/ml的水溶液。分别取15ml林可霉素溶液和1.6ml的PdCl₂溶液于25ml容量瓶中，加盐酸定容至刻度，摇匀。以同PdCl₂浓度的溶液作空白溶液。静置30min后，在波长190-800nm范围内进行扫描。结果表明，在波长为380nm±1nm处有最大吸收。因此，选择380nm作为测定波长。如图1所示。

图1  盐酸林可霉素紫外扫描图谱

2.2 林可霉素标准曲线的绘制

标准储备液  准确称取林可霉素对照品38.9mg于100ml棕色容量瓶中，加水溶解并定容至刻度。该标准溶液含林可霉素的浓度为332.206ug/ml。

工作液  分别取标准储备液2ml、4ml、6ml、8ml、10ml、12ml、15ml于25ml棕色容量瓶中，加入1.6ml的PdCl_2,用盐酸定容至刻度，并摇匀。

静置30min后，用同浓度的PdCl₂溶液作空白对照，在波长380nm处测定吸光度A。结果表明，吸光度A与林可霉素的浓度C成良好的线性关系。线性回归方程如下：

A＝4.2556*C＋0.0001（R²=0.9996, 26.6～199.3μg/ml）

2.3 回收率试验

二个水平三个重复的回收率试验见表1。.

表1 饲料添加林可霉素回收率

2.4 样品的测定

    准确称取样品0.2g左右于100ml棕色容量瓶中，加水溶解，超声溶解30min。然后加水定容至刻度，摇匀。过滤，取滤液15ml于25ml容量瓶中，同2.2同法配制并且检测吸光度A。结果见表2。

表2 样品测定结果（n＝3）

3.   讨论

    林可霉素与钯盐形成稳定配合物，在380nm波长处有最大吸收，而盐酸溶液在380nm处几乎没有吸收，测定结果与高效液相色谱测定结果接近，相对误差不超过3％。本法选用同浓度的PdCl₂盐酸溶液作空白对照，可以测定林可霉素的含量。实验证明方法简捷，结果准确，适用于饲料企业对药物添加剂的质量控制。